Gemelos de diferentes padres: un caso de superfecundación heteropaternal en Colombia

1 Grupo de Genética de Poblaciones e Identificación, Instituto de Genética, Universidad Nacional de Colombia, Богота, округ Колумбия, Колумбия, Universidad Nacional de Colombia, Grupo de Genética de Poblaciones e Identificación, Instituto de Genética, Colombia Колумбия,

Андреа Касас-Варгас

1 Grupo de Genética de Poblaciones e Identificación, Instituto de Genética, Universidad Nacional de Colombia, Богота, округ Колумбия, Колумбия, Universidad Nacional de Colombia, Grupo de Genética de Poblaciones e Identificación, Instituto de Genética, Colombia Колумбия,

Фреди Родригес

1 Grupo de Genética de Poblaciones e Identificación, Instituto de Genética, Universidad Nacional de Colombia, Богота, округ Колумбия, Колумбия, Universidad Nacional de Colombia, Grupo de Genética de Poblaciones e Identificación, Instituto de Genética, Colombia Колумбия,

Уильям Усакен

1 Grupo de Genética de Poblaciones e Identificación, Instituto de Genética, Universidad Nacional de Colombia, Богота, округ Колумбия, Колумбия, Universidad Nacional de Colombia, Grupo de Genética de Poblaciones e Identificación, Instituto de Genética, Colombia Колумбия,

Абстрактный

Heteropaternal superfecundation is an extremely rare phenomenon that occurs when a second ova released during the same menstrual cycle is additionally fertilized by the sperm cells of a different man in separate sexual intercourse.

In August, 2018, the Grupo de Genética de Poblaciones e Identificación at Universidad Nacional de Colombia received a request to establish the paternity of a pair of male twins with genetic markers. The following analyses were performed: amelogenin gene, autosomal short tandem repeat (STR), and Y-STR analyses by means of human identification commercial kits, paternity index, and the probability of paternity calculation and interpretation. A paternity index of 2.5134E+7 and a probability of paternity of 99.9999% for twin 2 were obtained while 14 out of 17 Y-chromosome markers and 14 out of 21 autosomal short tandem repeats were excluded for twin 1. The results indicated that the twins have different biological fathers.

Хотя гетеропатернальное суперфекундация редко наблюдается среди людей из-за его низкой частоты, в спорах об отцовстве для дизиготных близнецов обязательно требовать присутствия двух близнецов в тестировании, чтобы избежать ошибочных выводов.

Резюме

La superfecundación heteropaternal es un fenómeno extremadamente raro que se производит cuando un segundo óvulo, liberado durante el mismo ciclo menstrual, esferizado por un espermatozoide de un hombre differente en relaciones sexuales separadas. En agosto de 2018, el Grupo de Genética de Poblaciones e Identificación de la Universidad Nacional de Colombia recibió una solicitud para establecer la paternidad mediante marcadores genéticos de un par de mellizos varones, en quienes se hizo el de análisos varones, en quienes se hizo el de análisos varones, en quienes se hizo el de análisos varones repeticiones cortas en tándem (Короткие тандемные повторы,STR) autosómicas y del cromosoma Y (Y-STR) mediante kits comerciales de Identificación humana y cálculos e интерпретация индексов патернидад и вероятностей патернидад. Se obtuvo un índice de paternidad de 2,5134E + 7 y una probabilidad de paternidad de 99,9999% para el gemelo 2, en tanto que en el gemelo 1 se excluyeron 14 de los 17 marcadores del cromosoma Y y 14 de los 21 sistemas STR autosómicos evalados. Los resultados indicaron que los gemelos tienen diferentes padres biológicos. A pesar de que la superfecundación heteropaternal rara vez se observa en humanos debido a su baja frecuencia, en las disputas de paternidad para los gemelos dicigóticos, es Obligatorio exigir en la prueba la presencia de los dos gemelos para evitar sizes para evitar sizes.

Гетеропатернальное суперфекундация - чрезвычайно редкое явление, которое происходит, когда вторая яйцеклетка, выпущенная во время того же менструального цикла, дополнительно оплодотворяется сперматозоидами другого мужчины при отдельном половом акте, происходящем в течение короткого периода времени по сравнению с первым 1-4. Венк и др. Обнаружили три случая в 39 000 записей базы данных тестов на отцовство и показали частоту гетеропетеронной суперпродукции 2,4% среди дизиготных близнецов, родители которых были вовлечены в споры об отцовстве 5, 6. Тем не менее, частота этих случаев может варьироваться. в зависимости от частоты полового акта и двойной овуляции в популяции 3.

Это явление было впервые представлено Арчером в 1810 г. 7; он показал фенотипические различия между белой женщиной-близнецом и другой мулаткой-близнецом, и позже за его исследованием в 1978 году последовали Терасаки и др., типизировавшие антигены гистосовместимости 8. На сегодняшний день во всем мире зарегистрировано около 19 случаев гетеропатернальной суперфекундации 2, 4, 7–23. Было высказано предположение, что это перестанет быть редким событием, поскольку случаи описаны и будут описываться все чаще благодаря текущей доступности молекулярных методов, а также популярности и увеличению числа тестов на отцовство 2–4 , 14, 22.

В Колумбии Браво-Агилар представил случай гетеропатернальной суперпродукции в качестве примера в книге «Генетическая правда отцовства», где упоминаются два случая, выявленных в лаборатории, но не приводится никакой дополнительной информации 24.

Здесь мы представляем случай дизиготных близнецов от разных отцов, обнаруженных в Колумбии, о чем свидетельствуют ДНК-маркеры аутосомных коротких тандемных повторов (STR).

Презентация кейса

В августе 2018 года Grupo de Genética de Poblaciones e Identificación при Национальном университете Колумбии получила запрос на установление отцовства пары близнецов мужского пола с помощью генетических маркеров от предполагаемого отца, который подозревал родство детей и запросил проверку на отцовство. Оба близнеца были мальчиками, рожденными после 35 недель беременности; первый самец весил 1700 г, второй - 2380 г. Мать отрицала переливание крови во время беременности, но упомянула о приеме оральных контрацептивов до зачатия и о происхождении близнецов со стороны матери. Исследование проводилось с письменного согласия как матери близнецов, так и предполагаемого отца. Они также дали свое согласие на публикацию этой работы.

Генетические профили

Образцы крови были взяты у близнецов, их матери и предполагаемого отца по карточкам FTA. Мы получили по два независимых образца для каждого человека, взятого в разное время, и каждый образец исследовали в двух экземплярах.

ДНК экстрагировали с использованием двух пробойников на образец и промывали с использованием буфера для очистки реагентов FTA. Чтобы определить генетические профили, образцы были типизированы для 15 аутосомных STR (D8S1179, D21S11, D7S820, CSF1PO, D3S1358, TH01, D13S317, D16S539, D2S1338, D19S433, vWA, TPOX, D18S51, D5S818 как пол и пол, а также FGAin). маркер в AmpFlSTR Identifiler Amplification Kit ™ (Applied Biosystems).

Чтобы подтвердить и расширить этот анализ, мы использовали 16 аутосомных STR (D10S1248, vWA, D16S539, D2S1338, D8S1179, D21S11, D18S51, D22S1045, D19S433, TH01, FGA, D2S441, D3S1358, D1S1656, D12S391 в качестве полового признака) и маркер набора AmpFlSTR NGM SElect Kit ™ (Applied Biosystems).

В другой реакции 17 STR-маркеров Y-хромосомы (DYS456, DYS389I, DYS390, DYS389II, DYS458, DYS19, DYS385a / b, DYS393, DYS391, DYS439, DYS635, DYS392, GATA4374 амплифицировались одновременно с DYS392, GATA4374, DYS392, GATA4374), DYS392, GATA4374 AmpFlSTR Yfiler PCR Amplification Kit ™ (Applied Biosystems).

Эти амплификации были выполнены в Applied Biosystems 2720 Thermal Cycler ™. Запуск капиллярного электрофореза и обнаружение амплифицированных продуктов проводили с помощью генетического анализатора ABI PRISM 310 ™. Образцы анализировали с помощью программного обеспечения GeneMapper ID ™, версия 3.2 (Applied Biosystem).

Предполагаемый отец - близнец 1

Наблюдались расхождения в 14 аутосомных STR-маркерах и в 14 STR-локусах для Y-хромосомы (таблица 1) между предполагаемым отцом и близнецом 1.

Предполагаемый отец - близнец 2

Результаты подтвердили отцовство предполагаемого отца только для одного из близнецов, которого мы обозначили как «близнец 2». Все 21 аутосомный и 17 Y-хромосомный маркер соответствовали отцовству (таблица 1). Индекс отцовства составил 2,5134E + 7.

Таблица 1

Аутосомный STR Y-STR Система Предполагаемый отец Мама Твин 1 Твин 2 Y-STR Loci Предполагаемый отец Твин 1 Твин 2
D8S117914/1511/1311/1213/15DYS456171617
D21S1132,2 / 32,230 / 30,227 / 30,230,2 / 32,2DYS389I131213
D7S82011/128/108/88/12DYS3902421 год24
CSF1PO101212/1210/12DYS389II2928 год29
D3S135815/181715/1717/18DYS458161516
TH016/76 / 9,37 / 9,37 / 9,3DYS19141314
D13S31712/1310/1110/1110/13DYS385a / b11/1413/1611/14
D16S53910/12129/1212DYS393131413
D2S133817/2317/2222/2222/23DYS391111011
D19S43313/1413,2 / 13,212,2 / 13,213,2 / 14DYS439121112
VWA16/1816/1816/1818DYS635232223
TPOX88/1211/128/12DYS392131513
D18S5114/1812/1614/1612/14GATA H4111111
D5S81811111111DYS437141314
FGA22/242221/2222/24DYS438121212
D10S124815/1614/1513/1514/16DYS448191919
D22S104515/1615/161615/16
D2S44111/1410/1110/1111
D1S165611/1217 / 17,317,3 / 17,312/17
D12S3911617/2617/1816/17
SE3319 / 22,216 / 28,228,2 / 28,216 / 22,2
АмелогенинXYXXXYXY

Поскольку был доступен генетический профиль несомненной биологической матери, результаты аутосомного генотипирования показали, что у двух близнецов были разные отцы, что было подтверждено маркерами Y STR.

Обсуждение

Во всем мире было зарегистрировано несколько случаев гетеропатернального суперфекундации, возможно потому, что не все случаи были вовлечены в споры об отцовстве, что снижает вероятность их сообщения 3, 5, 22. Однако частота случаев, вероятно, будет расти со временем из-за доступности молекулярных методов, которые служат инструментом для правильного разрешения таких случаев, а также недавнего увеличения числа близнецов 2.

В этом случае два брата участвовали в исследовании отцовства в ответ на предварительное сообщение службы поддержки лаборатории, в котором объяснялось, что тест требовал присутствия обоих близнецов для изучения каждого из них по отдельности, а также важность включения матери. Мы наблюдали 14 предполагаемых случаев несовместимости отца и близнеца 1 по локусам Y-STR (таблица 1), при этом не было обнаружено никаких расхождений между предполагаемым отцом и близнецом 2, что позволило нам связать близнеца 2 с той же отцовской линией предполагаемого отца и исключить близнеца 1. отношение к нему. С другой стороны, анализ аутосомных маркеров позволил нам установить биологическое отцовство предполагаемого отца в отношении близнеца 2, исключив его как отца близнеца 1.Мы также подтвердили биологическое материнство, что исключило возможность обмена близнецами.

Разница между весом при рождении у близнецов 1 и 2 была значительной (680 г). Это также упоминалось другими авторами 4, 10, 12, 22 и объясняется разным гестационным возрастом детей как следствием времени, прошедшего между одним оплодотворением и вторым 21. Некоторые авторы предполагают, что время между первым и вторым оплодотворением. первое и второе оплодотворение длится около трех-четырех дней, хотя это время может быть еще больше (до 14 дней) 1, 5, 6.

Наконец, этот результат позволил нам выявить случай дизиготных близнецов от разных отцов, что является редким и нечастым событием, описанным в литературе. Этот случай подтверждает необходимость участия обоих близнецов в тестировании на отцовство, поскольку эти события происходят, хотя их частота невысока.

Выводы

Результаты настоящего исследования подтвердили, что у этих близнецов разные биологические отцы.

Благодарности

Авторы хотели бы поблагодарить мать и отца за письменное разрешение на публикацию этого отчета. Наконец, мы хотели бы выразить нашу благодарность Дайане Роа за поддержку, оказанную родителям и близнецам, Клаудии Бонилле за ее поддержку в проведении экстракции и амплификации ДНК, а также Даяне Суарес за ее комментарии.

Сноски

Citación:Mogollón F, Casas-Vargas A, Rodríguez F, Usaquén W. Близнецы от разных отцов: отчет о гетеропатерном случае суперфекундации в Колумбии. Biomédica. 2020; 40: 604-8. https://doi.org/10.7705/biomedica.5100

Contribución de los autores:Фернанда Моголлон: Концепция, дизайн, анализ и интерпретация данных, составление статьи и окончательное утверждение версии, которая будет опубликована. Андреа Касас-Варгас и Уильям Усакен: подготовка статьи, критический пересмотр рукописи с учетом важного интеллектуального содержания и окончательное утверждение версии, которая будет опубликована. Фреди Родригес: анализ генотипа для аутосомных STR и Y-хромосомы, и окончательное утверждение версии будут опубликованы

Financiación:Это исследование не получало каких-либо конкретных грантов от финансирующих агентств в государственном, коммерческом или некоммерческом секторах.